為了讓大家了解分光光度計的定量分析方法,上海旦鼎技術人員做了以下總結,同時也為您介紹了紫外分光光度計的使用范圍和波長范圍,以及可見分光光度計與紫外可見分光光度計的區(qū)別。
一、分光光度計定量分析方法
定量分析是分光光度計用的較為多的一種,定量分析的種類也比較多,以下將為您介紹幾種常用的定量分析方法:
1、標準法
在選定的波長處,在相同的測試條件下,分別測試標準樣品溶液C標和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標和A樣。然后,按下式求得樣品溶液的濃度或含量。
C樣=A樣/A標×C標
2、法:
法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用較為多的一種方法。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎的分析方法,某一物質在一定波長下ε值是一個常數(shù),石英比色皿的光程是已知的,也是一個常數(shù)。因此,可用紫外可見分光光度計在λmax波長處,測定樣品溶液的吸光度值A。然后,根據(jù)瑯伯比爾定律求出C=A/εb,則可求出該樣品溶液的含量或濃度。
3、標準曲線法
紫外可見分光光度計較為常用的定量分析方法是標準曲線法。即先用標準物質配制一定濃度的溶液,再將該溶液配制成一系列的標準溶液。在一定波長下,測試每個標準溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標,標準溶液對應得濃度為橫坐標,繪制標準曲線。較為后,將樣品溶液按標準曲線繪制程序測得吸光度值,在標準曲線上查出樣品溶液對應的濃度或含量。
二、紫外分光光度計使用范圍
凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結構的有機化合物,根據(jù)在特定吸收波長處所測得的吸收度,可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。
三、紫外分光光度計波長范圍
可見-紫外分光光度計。其應用波長范圍為200~400nm的紫外光區(qū)、400~850nm的可見光區(qū)。主要由輻射源(光源)、色散系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、吸收池、數(shù)據(jù)處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。
四、可見分光光度計與紫外可見分光光度計的區(qū)別
常說的“UV”,一般指 紫外可見分光光度計
波長范圍在:190-1100nm或190-900nm
可見分光光度計波長范圍:325-1100nm等
主要區(qū)別在于檢測范圍不一樣。
一般檢測六價鉻、甲醛等,可直接選擇可見分光光度計。
而國標等標準中規(guī)定要在325nm以下檢測的物質,
就需要用紫外(可見)分光光度計(一般含可見部分)
而決定波長范圍的配件即是光源:鹵氘燈(紫外用),鎢燈(可見用)。
鎢燈會比氘燈小一些。
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