農(nóng)藥速測卡是用對農(nóng)藥高度敏感的膽堿酯酶和顯色劑做成的酶試紙,可以快速檢測蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯這兩大類用量較大、毒性較高的殺蟲劑的殘留情況,選用的酶對甲胺磷敏感,抗干擾性強(qiáng),操作簡便,不需要配制試劑,不需要專業(yè)的技術(shù)培訓(xùn),可以不需要任何儀器設(shè)備單獨使用,產(chǎn)品容易貯存,攜帶方便,是現(xiàn)場檢測的較為佳方法。下面是上海旦鼎貿(mào)易有限公司整理的農(nóng)藥速測卡測定農(nóng)藥殘留的原理、操作步驟等。
農(nóng)藥速測卡參照MINI-MK (卡片式)農(nóng)殘速測卡
原理:膽堿酯酶可催化靛酚乙酸酯(紅色)水解為乙酸與靛酚(藍(lán)色),有機(jī)磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥對膽堿酯酶有抑制作用,使催化、水解、變色的過程發(fā)生改變,由此可判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。
試劑:
固化有膽堿酯酶和靛酚乙酸酯試劑的紙片(速測卡)。
pH7.5緩沖溶液:分別取15.0g磷酸氫二鈉 [Na2HPO4·12H2O]與1.59g無水磷酸二氫鉀[KH2 PO4 ],用500mL蒸餾水溶解。
儀器:
常量天平
有條件時配備37℃±2℃恒溫裝置。
操作步驟:
1、整體測定法
(1)選取有代表性的蔬菜樣品,擦去表面泥土,剪成1cm左右見方碎片,取5g放入帶蓋瓶中,加入10mL緩沖溶液,振搖50次,靜置2min以上。
(2) 取一片速測卡,用白色藥片沾取提取液,放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng),有條件時在37℃恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤。
(3)將速測卡對折,用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)。
(4)每批測定應(yīng)設(shè)一個緩沖液的空白對照卡。
2、 表面測定法(粗篩法)
(1)擦去蔬菜表面泥土,滴2滴~3滴緩沖溶液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。
(2)取一片速測卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。
(3)放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng),有條件時在37℃恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤。
(4)將速測卡對折,用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)。
(5)每批測定應(yīng)設(shè)一個緩沖液的空白對照卡。
結(jié)果判斷:
結(jié)果以酶被有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制(為陽性)、未抑制(為陰性)表示。
與空白對照卡比較,白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對照卡相同,為陰性結(jié)果。
對陽性結(jié)果的樣品,可用其它分析方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。
注意事項:
1、蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時,可采取整株(體)蔬菜浸提或采用表面測定法。對一些含葉綠素較高的蔬菜,也可采取整株(體)蔬菜浸提的方法,減少色素的干擾。
2、當(dāng)溫度條件低于37℃,酶反應(yīng)的速度隨之放慢,藥片加液后放置反應(yīng)的時間應(yīng)相對延長,延長時間的確定,應(yīng)以空白對照卡用手指(體溫)捏3min時可以變藍(lán),即可往下操作。注意樣品放置的時間應(yīng)與空白對照卡放置的時間一致才有可比性??瞻讓φ湛ú蛔兩脑颍阂皇撬幤砻婢彌_溶液加的少、預(yù)反應(yīng)后的藥片表面不夠濕潤,二是溫度太低。
3、紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)的時間以3min為準(zhǔn),3min后的藍(lán)色會逐漸加深,24h后顏色會逐漸退去。
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